Autor: NOGUEIRA, S.S.

Orientador: PRADO,V.F.

Outros autores: ;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS/BIOQUÍMICA / NEUROBIOLOGIA MOLECULAR

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA

Palavras-Chave: CHT1 - C TERMINAL DO CHT1 - CLONAGEM

O transportador de colina de alta afinidade (ChT1) é a proteína responsável por captar a colina existente na fenda sináptica, transportando-a para a porção citoplasmática do neurônio pré-sináptico. Esse transporte é o passo limitante para a síntese do neurotransmissor colinérgico. Nosso objetivo nesse trabalho, é a clonagem do fragmento C-terminal do ChT1 em vetor de expressão em levedura. Para conseguir este resultado utilizamos iniciadores específicos para amplificar por PCR a porção C-terminal do cDNA de ChT1 de rato, que nos foi enviado inserido no plasmídio pSPORT (Okuda et al, 2000). O fragmento amplificado foi digerido, purificado e clonado no vetor de expressão em levedura pAS21 (Clontech). Esse plasmídio vai ser utilizado para fazer o "screening" de uma biblioteca de cDNA de cérebro de rato, utilizando a técnica do duplo híbrido de levedura à procura de proteínas que se associem com a região C-terminal de ChT1.

Apoio: FAPEMIG, CNPqp>