Autor: CARNEIRO, A.C.A.V.

Orientador: VITOR, R.W.A.

Outros autores: BRANDÃO, G P;; FERREIRA, A.M. [CNPQ]; MELO, M.N.;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS / PROTOZOOLOGIA DE PARASITOS

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: PARASITOLOGIA

Palavras-Chave: TOXOPLASMA GONDII - RAPD-PCR - CEPAS BRASILEIRAS

Toxoplasma gondii é um parasito intracelular obrigatório que infecta uma grande variedade de hospedeiros vertebrados em todo o mundo, incluindo o homem. Apesar do grande número de hospedeiros e da ampla distribuição mundial, as cepas deste parasito apresentam uma baixa diversidade genética. A estrutura populacional de T. gondii é altamente clonal e as cepas podem ser agrupadas em duas ou três linhagens que diferem na virulência para camundongos. Entretanto, a maioria das cepas de T. gondii estudadas até o momento são provenientes da Europa e da América do Norte. Neste estudo, o método de Amplificação Aleatória de DNA Polimórfico - Reação em Cadeia da Polimerase (RAPD-PCR) foi utilizado para detectar polimorfismos de DNA entre 14 cepas de T. gondii isoladas no Brasil. As cepas RH (virulenta) e ME49 (avirulenta) foram usadas como cepas de referência. Taquizoítos purificados de T. gondii foram obtidos da cavidade peritoneal de fêmeas de camundongos Swiss e o DNA foi extraído com fenol/ clorofórmio/ álcool isoamílico. Quatro oligonucleotídeos arbitrários (10-mer) foram utilizados como iniciadores: B5 (5-TGCGCCCTTC-3), B12 (5-CCTTGACGCA-3), C8 (5-TGGACCGGTG-3) e C20 (5-ACTTCGCCAC-3). As cepas de T. gondii apresentaram perfis de RAPD com 71% de bandas compartilhadas utilizando o iniciador C8, 65% utilizando o C20, 79% utilizando o B5 e 75% usando o B12. As bandas polimórficas foram utilizadas para construir um fenograma, que revelou dois grupos de cepas de T. gondii correlacionados com a virulência para camundongos. Os resultados demonstraram que RAPD-PCR é uma técnica eficaz para detectar diversidade genética entre as cepas de T. gondii isoladas no Brasil. Estudos adicionais que utilizam RFLP estão sendo desenvolvidos para estabelecer a relação genética entre estas cepas.

Apoio: PROBIC (FAPEMIG), CNPqp>