Autor: DEL PUERTO, H. L.

Orientador: MARTINS, A. S

Outros autores: VASCONCELOS, A C; BATISTA, J J [CNPQ]; CAMPOS, P P; CAMPOS, P A; SILVA, J D B;; MORO, L.;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS / BIOLOGIA MOLECULAR

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: FISIOLOGIA E BIOFÍSICA

Palavras-Chave: DIAGNÓSTICO DE VCC - VÍRUS DA CINOMOSE CANINA - RT- PCR

O presente trabalho tem como objetivo o diagnóstico específico do vírus de cinomose canina (VCC) em amostras de sangue através da detecção do mRNA do nucleocapsídio viral por transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Foram coletadas amostras de sangue em EDTA de 9 cães clinicamente suspeitos de cinomose e 7 não suspeitos, num total de 16 animais. Para o RT-PCR as amostras de sangue foram processadas para extração de RNA total de leucócitos pelo método de Chomczynski & Sacchi (1987). Um par de iniciadores de oligonucleotídios, 20 nucleotídeos cada, foi selecionado para amplificação de um fragmento de 319 pb dentro da região que codifica a proteína do nucleocapsídio viral. A enzima TaqI, com dois sítios de restrição nas posições 134 e 296, respectivamente, foi selecionada pelo programa RESTRI (PC/GENE) para confirmação do fragmento alvo do PCR para VCC. Para o protocolo inicial e controle de RT-PCR foram utilizados iniciadores para a amplificação específica de um fragmento de 297 pb da DLDH canina, já padronizado no laboratório (MARTINS et alii, 1995). O diagnóstico rápido e sensível do VCC por RT-PCR será uma ferramenta importante em estudos epidemiológicos futuros e no controle clínico da cinomose canina.

Apoio: PIBIC- CNPq PRPq Amostras de sangue provenientes das Clinica Veterinária e Shopping das Rações, Clínica Veterinária Leonardo Maciel e Clínica Veterinária UNIVET.p>