Autor: REIS. B.L.F.S.

Orientador: GODARD.A.L.B.

Outros autores: MASSIRONI S; GUENET J L;; AZEVEDO. V.;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS / GENÉTICA HUMANA E MÉDICA

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: BIOLOGIA GERAL

Palavras-Chave: CARECA - MUTAGÊESE - MAPEAMENTO GENÉTICO

Este projeto, realizado em parceria com o Instituto Pasteur de Paris e a Universidade de São Paulo - USP, enfoca o mapeamento genético de mutações induzidas pelo agente mutagênico ENU (etil-nitroso-uréia), que causa mutações pontuais no genoma murino e leva ao aparecimento de doenças que possam recaptular fenótipos observados em doenças humanas. Através do rastreamento dos animais BALB/c tratados com ENU conseguimos isolar um mutante denominado "careca" (ca). Esta mutação é transmitida de modo autossômico recessivo e os animais doentes apresentam pelagem rarefeita, faltando pêlos em torno dos olhos, membros anteriores e posteriores e ao redor dos olhos. Para o mapeamento da mutação, animais parentais ca/ca da linhagem BALB/c foram cruzados com animais da linhagem C57BL/6. Os animais de F1 foram retrocruzados com animais BALB/c ca/ca. Deste cruzamento obtivemos 118 camundongos afetados que foram utilizados no mapeamento genético que foi realizado com o uso de 54 marcadores moleculares do tipo microssatélite, polimórficos, que cobriram todo o genoma. Através do padrão de bandeamento em gel de eletroforese, foram observadas as distorções de segregação para cada animal. A mutação foi localizada no cromossomo 7 de camundongo, sendo que para este cromossomo foram selecionados mais 10 marcadores de modo a densificar a região cromossômica suspeita de abrigar o gene mutante. À partir da análise do padrão de bandeamento em gel, construiu-se um haplótipo, indicando que o gene mutante se localiza abaixo do marcador D7Mit105. O próximo passo será utilizar outros marcadores microssatélites compreendidos nesta região e aumentar o número de animais analisados, refinando o mapeamento com o intuito de clonar o gene ca.

Apoio: FAPESP / CNPqp>