Autor: RODRIGUES, K.C.L.

Orientador: BRAVO, C.E.S.

Outros autores: FERREIRA, R.S. [PROBIC/FAPEMIG]; GOMES, M.T.R.. [PIBIC/CNPQ]; VAL, C.G.;;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS / BIOQUIMICA

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: BIOQUIMICA E IMUNOLOGIA

Palavras-Chave: PURIFICAÇÃO - LÁTEX - CICATRIZANTE

O látex de Carica candamarcensis possui uma composição química rica em carboidratos, vitaminas, sais minerais e peptidios de baixo peso molecular, alem de enzimas da classe das cisteino-proteinases, dotadas de alta atividade esterásica. Foi sugerido que algumas destas enzimas podem agir estimulando o processo de cicatrização celular cutâneo. A purificação dos componentes com atividade proteinasica do látex de C. candamarcensis, permite a avaliação das propriedades bioquímicas e farmacológicas dos seus componentes em estado puro. Nosso objetivo foi purificar uma das cisteino proteinases de alta atividade especifica através de métodos cromatográficos e posteriormente avaliar a capacidade desta enzima na digestão de colágeno, fibrina e elastina. O látex foi filtrado em coluna Sephadex G-10. O primeiro pico de proteínas responsável pela maior parte da atividade proteolítica foi selecionado e cromatografado em CM Sephadex. Da eluicao com gradiente salina obteve-se quatro picos que contem atividade proteolitica. Os dois primeiros picos foram selecionados por conter maior quantidade de proteínas e maior atividade proteolitica. Cada um destes picos, foi cromatografado em coluna Mono S Sepharose acoplada ao sistema FPLC obtendo-se no total dezoito picos contendo atividade amidasica superior a 1nmol/min/mg de proteína, o que é cerca de trinta vezes superior a atividade do látex. A maioria dos picos contem uma banda unica de proteínas medidas por SDS-PAGE com massa ao redor de 22-24 kDa. Eletroforeses em géis ácidos atribuem características a estes picos de papaína ou quimopapaina de C papaya. Digestão de colágeno, fibrina e elastina utilizando um dos picos com maior atividade proteolítica demonstrou a capacidade destas enzimas para dissolver os componentes do coagulo encontrados em ulceras cutâneas.

Apoio: FAPEMIG CNPqp>