Autor: ANDRADE, C.H.

Orientador: LOPES, M.T.P.

Outros autores: SALAS, C.E.;;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS / FARMACOLOGIA

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: FARMACOLOGIA

Palavras-Chave: MUTAGENICIDADE - AMES - SALMONELLA

O Teste de Ames é empregado para avaliar a atividade mutagênica de compostos químicos, utilizando linhagens de bactérias Salmonella thiphimurium com mutações no operon histidina (his-), que as impossibilitam de crescerem em um meio sem histidina. A avaliação da mutagenicidade pelo Teste baseia-se na quantidade de colônias de bactérias (revertantes) que cresceram em placa de ágar deficiente em histidina, devido a uma reversão genética, 48 horas após a inoculação juntamente com o composto a ser analisado. Após demonstrarmos que várias substâncias em estudo não são mutagênicas no Teste de Ames sem ativação, houve a necessidade de avaliação destas na presença do extrato hepático S9 requerido para ativação metabólica de compostos pré-mutagênicos. Após indução e extração, a padronização do extrato S9 foi realizada utilizando-se duas substâncias pré-mutagênicas padrões (Aflotoxina B1 e 2-Aminofluoreno) em associação com as cepas TA-97, 98, 100 e 102. As reversões contabilizadas nas placas preparadas com ágar de inoculação (2 ml) + cepa bacteriana (0.1 ml) + solução de histidina/biotina 0.1 M (0.2ml) + 2-Aminofluoreno (2 ?g) + S9 (0.5 ml) foram em média 41% maiores que as reversões contabilizadas nas placas controle sem o S9. As análises empregando a Aflotoxina B1 estão em via de finalização e os resultados preliminares também apontam que a atividade do homogenato hepático S9 é eficaz quanto a ativação de substâncias pré-mutagênicas e pode provocar um aumento relevante no número de reversões em todas a cepas. Os resultados da padronização do S9 com 2-aminofluoreno, aliados aos atuais dados usando Aflotoxina-B1, indicam que o S9 está apto para ser usado como ativador enzimático nas análises futuras.

Apoio: CNPq FAPEMIGp>