Autor: SILVA, C.F.T.
Orientador: MACHADO, C.R.
Outros autores: ;
Linhas de pesquisa no CNPq: BIOQUÍMICA / BIOLOGIA MOLECULAR
Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA
Palavras-Chave: REPARO DE DNA - SCHISTOSOMA MANSONI - SACCHAROMYCES CEREVISIAE
A estabilidade do material genético é essencial para a manutenção da vida. Em busca de genes de Schistosoma mansoni envolvidos no reparo de DNA, foi realizado um experimento de complementação funcional heteróloga em bactérias deficientes no reparo por excisão de bases.Esse método nos permitiu isolar o gene SmIMP4, capaz de complementar cepas expostas ao agente alquilante metil metano sulfonato (MMS). A análise da sequência desse gene revelou uma alta homologia com o gene IMP4 de Saccharomyces cerevisiae, que expressa um componente da Ribonucleoproteína Nucleolar U3, a qual está envolvida no processamento de rRNA. Com o objetivo de determinar se o gene IMP4 apresenta alguma atividade relacionada ao metabolismo de DNA, produzimos uma levedura mutante parcialmente deletada para este gene e estudamos seu fenótipo. Além disso, procuramos verificar se o gene de S. mansoni seria capaz de complementar as leveduras deficientes em IMP4. Os fenótipos alterados observados foram: crescimento lento (o que seria esperado em uma cepa deficiente na síntese de RNA ribossomal) e sensibilidade ao MMS. Não verificamos nenhuma outra alteração em fenótipos relacionados ao reparo de DNA, tais como, sensibilidade à hidroxiuréia, radiação ionizante e radiação UV. O gene SmIMP4 foi capaz de complementar parcialmente os fenótipos de crescimento lento e sensibilidade ao MMS apresentados pela levedura IMP4 mutada. Portanto, os dados obtidos até o momento indicam que os genes SmIMP4 de S.mansoni e IMP4 de S. cerevisae estão envolvidos tanto no metabolismo de rRNA quanto no reparo de DNA.
Apoio: CNPqp>
|