Autor: FITTIPALDI, J.F.

Orientador: PESQUERO, J.L.

Outros autores: LIMA, M P;;

Linhas de pesquisa no CNPq: BIOFÍSICA 2.09.00.00-7 / BIOFÍSICA MOLECULAR 2.09.01.00-3

Unidade: INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Departamento: FISIOLOGIA E BIOFÍSICA

Palavras-Chave: TONINA - ANGIOTENSINA II - GLÂNDULA SUB-MANDIBULAR

A angiotensina II (Ang II) é um importante peptídeo envolvido na regulação da homeostase dos líquidos corporais, que pode ser produzido pela ação de diversas enzimas a partir da angiotensina I (Ang I) ou do angiotensinogênio (AG). Dentre as enzimas liberadoras de angiotensina II, destacamos a tonina, capaz de promover a liberação de Ang II tanto a partir da Ang I como do angiotensinogênio. Tonina está presente em diversos tecidos de rato e de humano sendo entretanto os maiores níveis presentes na glândula submandibular de rato. Não existe qualquer informação a respeito da presença da enzima em tecido de camundongo. Este trabalho está sendo desenvolvido com o objetivo de isolar e caracterizar enzimas com atividade tonina-símile a partir de glândula submandibular (GS) de camundongo. Foram utilizados camundongos C57 black6 adultos. As GS foram homogeneizadas em sacarose 0,25 M (pH 7,0), contendo os inibidores a 10 mM: dipiridil, EDTA, o-fenantrolina, tetrationato de sódio. O homogenato foi centrifugado, dialisado contra tampão Tris-HCl 20 mM pH 8,4 e aplicado em coluna de DEAE-celulose. A atividade das frações foi determinada incubando-as com o substrato sintético TDP, que corresponde à porção N-terminal do AG. A Ang II formada foi determinada por radioimunoensaio. As frações ativas foram aplicadas em eletroforese de disco utilizando o gel de poliacrilamida. O gel foi recortado, os fragmentos macerados e a proteína eluida do gel para determinação da atividade. A fração ativa foi aplicada em gel de poliacrilamida para análise da pureza da enzima. Os resultados mostram a presença de uma fração que apresenta atividade tonina, com massa molecular em torno de 60 kDa, mais próximo da observada para a tonina de humano e bem maior que a observada para a tonina de rato (29 kDa).

Apoio: FAPEMIG / CAPES / FAPESPp>