Autor: CARVALHO, R.F.
Orientador: MOREIRA, E.C.
Outros autores: RODRIGUES, R O;; VELOSO, I.F.;
Linhas de pesquisa no CNPq: MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA / EPIDEMIOLOGIA
Unidade: ESCOLA DE VETERINÁRIA
Departamento: MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA
Palavras-Chave: BOVINOS - URINA - CONSERVAÇÃO
As leptospiroses são zoonoses de grande importância econômica na exploração pecuária. A sorovariedade hardjo tem se mostrado mais bem adaptada em bovinos em várias partes do mundo. A caracterização e a identificação da Leptospira sp são bastante importantes na implementação de programas de vacinação adequados. Este trabalho teve como objetivo avaliar métodos de conservação de urina para realização da PCR. Leptospira sorovariedade hardjo, genótipo Hardjoprajitno, cultivada em EMJH, foi contada em câmara de Neubauer e, após centrifugação, o sedimento foi ressuspenso em urina fresca. Quatro métodos de conservação foram testados: 1) adição de formol a 0,3% e congelamento a -20 C; 2) ressuspensão do sedimento em PBS e congelamento a -20 C; 3) lavagem do sedimento com 1mM EDTA e água, ressuspensão em água e congelamento a -20 C; 4) adição de formol a 0,5% e 0,1M EDTA, lavagem do sedimento com 1mM EDTA e água e congelamento a -20ºC. Estas alíquotas foram submetidas a extração com kit comercial e a concentração do DNA foi determinada através de eletroforese em gel de agarose.Dos métodos de conservação analisados foi possível observar amplificação, após a PCR, nos métodos 1, 2 e 3. Os métodos 2 e 3 apresentaram melhor visualização dessa amplificação.
Apoio: PIBIC/CNPqp>
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