Resumos da XI Semana de Iniciação Científica
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CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E AGRÁRIAS

Padronização dos métodos de conservação de urina de bovinos para extração de DNA e amplificação pela PCR

Autor: CARVALHO, R.F.

Orientador: MOREIRA, E.C.

Outros autores: RODRIGUES, R O;; VELOSO, I.F.;

Linhas de pesquisa no CNPq: MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA / EPIDEMIOLOGIA

Unidade: ESCOLA DE VETERINÁRIA
Departamento: MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA

Palavras-Chave: BOVINOS - URINA - CONSERVAÇÃO

As leptospiroses são zoonoses de grande importância econômica na exploração pecuária. A sorovariedade hardjo tem se mostrado mais bem adaptada em bovinos em várias partes do mundo. A caracterização e a identificação da Leptospira sp são bastante importantes na implementação de programas de vacinação adequados. Este trabalho teve como objetivo avaliar métodos de conservação de urina para realização da PCR. Leptospira sorovariedade hardjo, genótipo Hardjoprajitno, cultivada em EMJH, foi contada em câmara de Neubauer e, após centrifugação, o sedimento foi ressuspenso em urina fresca. Quatro métodos de conservação foram testados: 1) adição de formol a 0,3% e congelamento a -20 C; 2) ressuspensão do sedimento em PBS e congelamento a -20 C; 3) lavagem do sedimento com 1mM EDTA e água, ressuspensão em água e congelamento a -20 C; 4) adição de formol a 0,5% e 0,1M EDTA, lavagem do sedimento com 1mM EDTA e água e congelamento a -20ºC. Estas alíquotas foram submetidas a extração com kit comercial e a concentração do DNA foi determinada através de eletroforese em gel de agarose.Dos métodos de conservação analisados foi possível observar amplificação, após a PCR, nos métodos 1, 2 e 3. Os métodos 2 e 3 apresentaram melhor visualização dessa amplificação.

Apoio: PIBIC/CNPqp>

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS
25 a 29 de Novembro de 2002
PRÓ-REITORIA DE PESQUISA
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