Autor: DIAS, G. R. C.

Orientador: LOBATO, F. C. F.

Outros autores: JÚNIOR, A C O [(IC/CNPQ]; CARVALHO, A V A; PINTO, F F [(ME/CAPES]; DIAS, L D [(ME/CAPES]; GONÇALVES, L A; CASTRO, M G [(IC/CNPQ]; MARTINS, N E; PARREIRAS, P M; NASCIMENTO, R P; ASSIS, R A [(DO/CNPQ];;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS AGRARIAS / MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA

Unidade: ESCOLA DE VETERINÁRIA
Departamento: MEDICINA VETERINÁRIA PREVENTIVA

Palavras-Chave: PCR - CLOSTRIDIUM CHAUVOEI - TECIDOS PARAFINIZADOS

Clostridium chauvoei é o agente etiológico do carbúnculo sintomático, uma doença altamente letal de bovinos, ovinos e caprinos. Empregou-se uma técnica de PCR para amplificação da sub-unidade 16S rRNA para a detecção de C. chauvoei em tecidos de cobaios fixados em formol e incluídos em parafina (TCFP). TCFP de 60 cobaios que foram previamente inoculados intramuscularmente com 0,25 mL de cultura pura de C. chauvoei (ATCC 10092), Clostridium septicum (ATCC 12464), Clostridium sordellii (ATCC 9714), Clostridium novyi (ATCC 19402) e Clostridium perfringens (ATCC 3624), juntamente com 0,25 mL de uma solução estéril de cloreto de cálcio (CaCl2 ) a 10%. Para cada agente utilizou-se 10 cobaios e o mesmo número de animais foi inoculado com 0,5 mL de CaCl2 a 10% como controle. Músculo da área de inoculação (MAI), coração, baço e fígado foram obtidos após sacrifício dos animais. Para extração do DNA das amostras inoculadas, os tecidos foram tratados com proteinase K (200 ?g/ mL) e precipitados com fenol/ clorofórmio (1:1). C. chauvoei foi detectado em todas seções de MAI, coração e fígado. O microrganismo não foi detectado em seções de baço e não houve reação cruzada com os outros agentes. Estes resultados demonstram que a técnica de PCR desenvolvida neste estudo pode ser usada para detecção de C. chauvoei em tecidos fixados em formol e incluídos em parafina.

Apoio: Fapemig, CNPq, PRPqp>