Autor: ABREU, R.V.
Orientador: MORAES-SANTOS, T.
Outros autores: ;
Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS DA SAÚDE / BIOQUÍMICA DA NUTRIÇÃO
Unidade: FACULDADE DE FARMÁCIA
Departamento: ALIMENTOS
Palavras-Chave: HEPATÓCITOS; - XENOBIÓTICOS - NUTRACÊUTICOS
O metabolismo de xenobióticos, entre os quais se encontram alguns nutracêuticos, ocorre predominantemente no fígado envolvendo o sistema de biotransformação. Com a finalidade de verificar os efeitos in vivo e ex vivo de nutracêuticos e ou alimentos funcionais, propusemo-nos isolar hepatócitos e estabelecer as condições adequadas para determinar atividades enzimáticas e outros parâmetros bioquímicos. Para isso, ratos adultos jovens anestesiados tiveram o fígado perfundido com meio próprio por cerca de 5 minutos e em seguida, com o mesmo meio contendo EGTA. Por fim, foi usado o mesmo meio porém acrescido de colagenase, piruvato e cálcio. Os hepatócitos foram colhidos e lavados com meio adequado, centrifugados e ressuspensos em meio de Krebs. Após 5 minutos de repouso em gelo, as células foram novamente centrifugadas e ressuspensas em 10 mL do meio de Krebs. A viabilidade celular foi determinada pelo teste de exclusão com azul de tripan. A contagem de células viáveis permaneceu praticamente inalterada por 6 horas. Diluições adequadas foram encontradas para padronização de métodos visando a determinação de proteínas, glutationa transferase (GST) e peroxidação lipídica (MDA). A diluição para os três procedimentos foi de 1:50, 1:100 e 1:100, respectivamente. Os valores obtidos nas determinações dos parâmetros citados estão de acordo com aqueles encontrados na literatura.
Apoio: CNPq; FAPEMIG; PRPq/UFMGp>
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