Autor: TEODORO, C.C.

Orientador: DUSSE,L.M.S

Outros autores: FERNANDES, A P; CARVALHO, M G;; GUIMARÃES, DAM; GODOI, L.C.; ABRÃO, R.; CARDOSO, J;

Linhas de pesquisa no CNPq: CIÊNCIAS DA SAÚDE / HEMATOLOGIA

Unidade: FACULDADE DE FARMÁCIA
Departamento: ANÁLISES CLÍNICAS E TOXICOLÓGICAS

Palavras-Chave: TROMBOFILIA - MUTAÇÕES - DIAGNÓSTICO MOLECULAR

Os eventos tromboembólicos, sejam venosos ou arteriais, são relativamente frequentes na população e resultam de fatores hereditários ou adquiridos, que isoladamente ou em conjunto, resultam em uma situação de desequilíbrio hemostático pré-trombótico. Entre os principais fatores genéticos associados à trombofilia encontram-se as mutações do fator V (Leiden) e do gene da protrombina (G20210A). O objetivo desse trabalho foi padronizar o diagnóstico simultâneo destas duas mutações através de PCR-RFLP. Foram utilizadas amostras diagnosticadas pela metodologia convencional, a qual envolve a detecção das mutações por amplificação e digestão separadamente dos produtos da PCR com as enzimas Hind III e Mnl I. Foram preparados oligonucleotídeos que permitem a amplificação e digestão dos dois produtos de PCR simultaneamente com a enzima Hind III. Inicialmente os produtos de PCR obtidos em PCR distintas foram submetidos à digestão isoladamente com Hind III. Uma vez verificado o perfil adequado, foi conduzida PCR para amplificação simultânea dos dois produtos de PCR, seguida da digestão, em uma única reação, com Hind III. Até o momento, os resultados são concordantes entre a nova metodologia e o diagnóstico firmado pela técnica convencional, com exceção do perfil de indivíduos normais para mutação para protrombina que apresenta-se semelhante ao de indivíduos portadores da mutação em heterozigose. Assim a metodologia que permite a detecção do fator V Leiden e gene da protrombina (método simplificado) encontra-se em fase final de padronização. O diagnóstico simplificado dessas mutações tem potencial de diminuir os custos dos exames moleculares e, consequentemente, torná-los mais acessíveis e abrangentes permitindo maior acesso da população aos mesmos.

Apoio: FAPEMIGp>